《火影忍者》大蛇丸和三代火影对决是第69集。
第69集 期待已久的A级任务！
小樱解除了鸣人和鹿丸的幻术，并按照卡卡西的指示，去追踪佐助，并阻止佐助的行动，之后在安全地点待命。鸣人刚刚醒来，就被眼前发生的事情惊呆了，毕竟谁也没想到，好好一场中忍考试，竟然变成了一场战争。与此同时，在大蛇丸的结界中，火影和大蛇丸展开了战斗，可惜结界外的人只能看到战况，却无法帮忙。实际上，在结界内，大蛇丸将初代火影和二代火影召唤了出来，三代火影该如何同前两代火影战斗呢？
火影忍者动漫中大蛇丸和第三代火影猿飞佐助的决战发生在第二百四十五集左右。
火影忍者动漫中大蛇丸原本是三代火影猿飞佐助的弟子，但是在木叶村研究活人的事件被三代火影发现后逃走，三代火影猿飞佐助因为不舍得杀掉自己的这个徒弟，而选择放走了大蛇丸。
